In:
EPPO Bulletin, Wiley, Vol. 52, No. 1 ( 2022-04), p. 141-148
Abstract:
Японский жук ( Popillia japonica Newman) (Coleoptera Scarabaeidae) является многоядным инвазивным вредным организмом, включенным в карантинные перечни в Европе и во многих странах Африки, Азии и Америки. Для идентификации взрослых особей и преимагинальных стадий развития не было разработано специальных молекулярных методов. Чтобы восполнить этот пробел, в нашем исследовании был разработан быстрый метод (2 часа) на основе SYBR Green ПЦР в реальном времени для идентификации личинок и взрослых особей P. japonica. Химический метод SYBR Green был избранный из‐за его экономичности и адаптивности, хотя он имеет более низкую специфичность, чем другие тесты ПЦР в реальном времени, такие как тест TaqMan, который требует разработки зонда. Была проверена специфичность праймеров in‐silico, и теоретический ампликон не совпал ни с одной из последовательностей, представленных в банке данных. Диагностическая специфичность (исключительность) теста была оценена путем тестирования метода на таксономически родственных видах ( Popillia anomaloides Kraatz, P. hilaris Kraatz и P. fallaciosa Fairmaire), на других жесткокрылых и совершенно не родственных видах насекомых, при этом перекрестных реакций не было. Были оценены характеристики производительности теста с точки зрения диагностической специфичности (инклюзивности), аналитической чувствительности и точности. Аналитическая чувствительность, определенная на одной личинке, показала значение LoD 3,20 пг/мкл. Разработанный молекулярный тест может быть очень полезен для фитосанитарных проверок в пунктах ввоза для нормативного подтверждения идентичности образцов и/или для мониторинга присутствия и распространения P. japonica в полевых условиях.
Type of Medium:
Online Resource
ISSN:
0250-8052
,
1365-2338
Language:
English
Publisher:
Wiley
Publication Date:
2022
detail.hit.zdb_id:
2033181-2
SSG:
12
