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Tesis doctoral inédita, leída en Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología Molecular. Fecha de lectura: 14/11/2013 ; Existen muchos animales que muestran una gran capacidad para regenerar tejidos e incluso órganos completos. Cuáles son los procesos celulares y genéticos que controlan esta capacidad es uno de los problemas más interesantes de la biología del desarrollo. Los discos imaginales de Drosophila melanosgaster son un sistema modelo idóneo para estudiar este proceso. El método clásico para estudiar la regeneración en Drosophila ha sido la realización de cultivos in vitro e in vivo de tejidos fragmentados. Una de las desventajas de estos métodos, es que es imposible reproducir las condiciones fisiológicas que se producen durante el desarrollo normal. Además, el tipo de manipulación al que se ven sometidos los discos, les provoca un estrés severo que da lugar a distintas respuestas celulares no asociadas a la regeneración, como incremento de la muerte celular o una parada temporal de la división. Recientemente, ha sido desarrollado un método no-quirúrgico" para la inducción de muerte celular masiva en regiones concretas de los discos de forma temporal, después de la cual, se puede analizar el proceso de recuperación de los mismos. Esta técnica imita algunos aspectos de la ablación microquirúrgica, aunque hay diferencias importantes entre estos dos métodos. Por ejemplo, la sobreexpresión de un inductor de muerte celular no es suficiente para matar todas las células del territorio diana, de manera que co-existen células vivas con células que están muriendo, lo que permitiría el intercambio de señales entre ellas. En esta tesis presentamos una nueva técnica que hemos desarrollado para eliminar una parte del disco imaginal del ala dentro de la larva, sin necesidad de romper la cutícula. De esta forma, podemos estudiar el proceso regenerativo en las condiciones fisiológicas en las que ocurre el desarrollo. Usando este método hemos analizado diferentes aspectos de la regeneración del disco imaginal de ala de Drosophila melanogaster. Los resultados presentados en este trabajo indican que durante las primeras etapas de la regeneración del disco de ala, además de la formación del blastema, se da un proceso de reorganización de tejido y patrón, independiente de proliferación celular, que puede afectar a grandes territorios del disco. Durante este proceso, se altera la expresión de genes de patrón y se pierden temporalmente marcadores de destino celular. Este proceso inicial se asemeja en algunos aspectos a la regeneración que sigue un modelo morfaláctico. Por otro lado, nuestros resultados sugieren que la función de Wingless (Wg) es prescindible durante las primeras etapas de la regeneración. La expresión de wg es regulada por una bajada de actividad de la ruta de Notch, cuyo papel en el disco de ala es fundamental para el crecimiento de ésta y una correcta formación del patrón. Por último, hemos analizado si la expresión temporal ectópica de miembros de distintas rutas de señalización que se activan en el borde de la herida tras la amputación, eran suficientes para reproducir los efectos que suceden durante la regeneración .
Note:
Dissertation 2014
Language:
Spanish
